흰쥐 말초신경에서 성체 Schwann 세포의 성공적인 배양

• 영문명: Culturing Successfully Adult Schwann Cells from Peripheral Nerve of Rats
• 발행기관: 대한소아신경학회
• 저자명: 신미영(Mi-Young Shin) 노영래(Young-Nae Roh) 우지현(Ji Hyun Woo) 김영훈(Young-Hoon Kim) 황경태(Kyung-Tai Whang) 유도성, 조경석(Kyung Suck Cho) 김달수(Dal Soo Kim)
• 간행물 정보: 『Annals of Child Neurology(구 대한소아신경학회지)』대한소아신경학회지 제10권 제1호, 14~19쪽, 전체 6쪽
• 주제분류: 의약학 > 의학일반
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2002.05.30

국문 초록

목적: 성체포유동물의 말초신경에서 유래한 Schwann 세포는 결체조직이 많고 잘 분화된 세포이기 때문에 성공적인 배양이 어렵고 증식이 잘 되지 않는 것으로 알려져 있다. 그러나 신경손상 등으로 조건화를 하면 성숙말초신경에서도 Schwann 세포의 성공적인 배양이 가능한 것으로 최근에 알려져 있다. 이에 저자들은 국내 최초로 흰쥐의 좌골신경을 이용하여 성숙말초신경에서 조건화된 손상을 줌으로서 Schwann 세포를 배양하는데 성공하였으며 수율도 높일 수 있었다. 방법: 250-300 g의 Sprague-Dawley 수컷 흰쥐를 사용하였으며 배양 2주 전에 좌측 좌골신경을 신경손상을 일으켜 조건화한 뒤 키웠다가 다시 좌골신경에서 20 mm 신경조각을 적출하여 RPMI-1640 배양액에 2주간 배양하였다. Schwann 세포의 확인은 s-100항체를 이용한 면역염색법으로 확인하였다. 결과: 1)조건화된 손상 후 평판에서 배양한지 48시간부터는 양극 및 삼극세포를 발견할 수 있었으며 세포수는 12일까지 지속적으로 증가하였다. 2)3-4시간의 소화시간으로도 분리한 세포의 숫자는 줄지 않고 붙은 세포의 수를 증가시킬 수 있었다. 3)부착된 Schwann 세포는 배양 후 12-14일에 최고로 많이 관찰되었다. 4)부착된 Schwann 세포의 대부분은 전형적인 원형의 세포체를 가지고 있으며 뚜렷한 핵과 양극 혹은 삼극뻗음이 있어서 전체적으로는 방추형의 모양을 하였다. 결론: 이러한 결과로 볼 때 조건화된 손상이 말초신경에서 성체 Schwann 세포를 성공적으로 분리하여 배양할 수 있게 한다는 것을 알 수 있었다.

영문 초록

PURPOSE: Schwann cells are difficult to isolate from adult mammalian peripheral nerves because of the abundant connective tissue and the highly differentiated state of the cells, particularly those involved in the formation of myelin. It has been shown that in vivo, both neurons and Schwann cells are conditioned by a nerve lesion, speeding up the Schwann cell proliferation and the neuronal regeneration. In this study with adult rat peripheral nerves, we report that a conditioning lesion increases Schwann cells and of cells which successfully attach to a tissue culture striatum. METHODS: The study was done with Sprague-Dawley male rats(250-300 g). Their left sciatic nerves were exposed, severed at the sciatic notch and deflected. After 14 days, with 20 mm segments the nerves were excised from the distal stump of the conditioned sciatic nerves. Schwann cells were cultured in RPMI-1640 media. The identity of the cells was verified with antibody staining using S-100. RESULTS: The lesion evoked a progressive and significant increase in the number of cells obtained as early as 48 hr of the plating, until day 12. Decreasing the duration of enzyme digestion to 3 and 4 hrs markely increased the number of attached Schwann cells. The peak numbers of attached Schwann cells was observed between day 12 and day 14 of the plating. Most attached Schwann cells had typical oval-shaped cell bodies, with prominent nuclei and bipolar cell extensions, resulting in overall spindle shapes. CONCLUSION: Our findings indicate that a conditioning lesion enables us to isolate and culture adult Schwann cells successfully from the peripheral nerves of rats.

키워드

Schwann cell Peripheral Nerve Cell culture