무지개송어에서 수질오염 물질에 의한 cytochrome P450 isoenzyme의 유도에 관한 연구

• 영문명: Cytochrome P450 isoenzymes induction in rainbow trout exposured by water pollutants
• 발행기관: 한국예방수의학회
• 저자명: 윤원기(Won Kee Yoon) 조성환(Sung Whan Cho) 정규식(Kyu Shik Jeong) 류시윤(Si Yun Ryu)
• 간행물 정보: 『Korean Journal of Veterinary Public Health』Vol.24, No.3, 203~214쪽, 전체 12쪽
• 주제분류: 의약학 > 면역학
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2000.09.30

국문 초록

최근 산업의 발달로 인한 심각한 환경오염에 의해 사람에게 치명적인 손상을 유발시키는 물질들이 날로 증가하고 있는 추세이다. 따라서 본 실험에서는 이들 물질 중에서 3MC, BP, phenol, PB 및 TCDD를 무지개 송어에 투여한 후 cytochrome P450 발현양상의 변화를 면역조직화학적인 방법, Western blotting, RT-PCR 및 Northern blotting 방법을 이용하여 관찰하였으며, 이를 근거로 어류에서의 CYP450 isoenzyme의 발현유무와 유전자의 발현양상을 탐색하는 기술을 확립하여 수질오염의 조기경보체계를 수립하는데 필요한 biological monitoring system을 확립하는데 필요한 기초자료를 제공하고자 하였던 바 그 결과는 다음과 같다. 면역조직화학적인 관찰에서는 3MC, BP, phenol, phenobarbital 그리고 TCDD를 투여한 군에서 CPY1A1 항체에 대해 양성반응을 나타내었으며 그 반응은 시간의 경과에 따라서 증가되는 경향이 인정되었다. Western blotting을 실시한 결과 3MC, BP, phenol, phenobarbital 그리고 TCDD 투여군이 CYPIAI에 대해 양성반응을 나타내었으며, 그 반응성은 면역조직화학적인 소견에서와 유사한 양상이 인정되었다. 그리고 CYP2BI에 대한 양성반응은 phenol을 투여한 군에서만 관찰되었다. RT-PCR을 이용한 CYP450 유전자의 발현양상을 관찰한 결과 3MC, BP, phenol, pheno-barbital 그리고 TCDD 투여군에서 CYPIAI에 특이적인 mRNA가 발현되었다. 이와 같은 양상은 3MC, BP, phenol, phenobarbital 그리고 TCDD에 의한 pretranslational mechanism에 의하여 나타난다. Northern blotting을 실시한 결과 3MC 투여군과 BP 투여군에서는 8시간째에 CYP1A1에 특이적인 mRNA가 강하게 발현되었으며, phenol과 TCDD 투여군에서는 18시간째, phenobarbital 투여군에서는 48시간째에 각각 강하게 발현되었다. 이상에서 3MC, BP, phenol, phenobarbital 그리고 TCDD를 투여한 무지개 송어에서 CYP1A1과 phenol 투여군에서 CYP2B1이 유도되는 것이 확인되었다. CYP450 isoenzyme에 대한 항체를 이용한 western blotting과 이들 isoenzyme을 발현시키는 특정유전자에 대한 probe를 이용한 본 실험의 RT-PCR 및 northern blotting 자료는 특정한 종류의 유해성 외인성 물질에 의한 수질오염 여부를 판단하는데 좀 더 정확하고 신속한 결과를 제공하는 자료로 사용할 수 있을 것으로 사료된다.

영문 초록

The contamination of water by chemicals which are classified as toxic pollutants for humans and other living organisms may cause serious environmental problems and finally can lead to fetal diseases. The increasing concerns in inland waters to investigate in Situ environmental monitoring are focus on the use of bioindicators. For this purpose, in recent years fish have become known as suitable organisms. We investigated the expression of cytochrome P45O isoenzymes with a time by 3-MC, BP, phenol, PB and TCDD in rainbow trout. In immunohistochemical study, rainbow trout treated with 3-MC, BP, phenol, PB and TCDD were immunoreactive to CYP450 1A1 and the reactivify increased in a time dpendent manner. In immunoblot analyses, hepatic microsomes of 3-MC, BP, phenol, PB and TCDD-treated rainbow trout showed positive immunoreactivity to CYP450 1A1 antibody, and the phenol-treated group was especially positive for CYP4502B1 antibody. The immunoreactive patterns were consistent with those of immunohistochermstry. In RT-PCR, the expression of specific mRNA which codes for the CYP1A1 was induced in 3-MC, BP, phenol, PB and TCDD-treated rainbow trout. In Northern blotting analysis using a specific probe for CYP1A1 mRNA, the levels of CYP1A1 mRNA reached a maximum after 8 hours in the 3-MC and BP-treated groups. In phenol-and TCDD-treated groups, CYP1A1 mRNA levels reached a maximum after 18 hours of treatment, and after 48 hours in the PB-treated group. These data show that investigation of expression of cytochrome P450 isoenzymes in fish may be a useful tool for rapidly and accurately screening water pollution status.

목차

ABSTRACT

서론

재료 및 방법

결과

고찰

국문요약

참고문헌

키워드

Trout Cytochrome P450s Water pollutants Liver