두 개봉합 발육 연구를 위한 형질변환 쥐의 개발

• 영문명: Generation of a trasgenic mouse model to study cranial sutrure development; Apert syndrome
• 발행기관: 대한치과교정학회
• 저자명: 이기준(Kee-Joon Lee) Chootima Ratisoontorn 백형선(Hyoung-Seon Baik) 박영철(Young-Chel Park) 박광균(Kwang-Kyun Pa
• 간행물 정보: 『The Korean Journal of Orthodontics』제33권 제6호, 485~497쪽, 전체 13쪽
• 주제분류: 의약학 > 기타의약학
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2003.12.31

국문 초록

악안면 구조의 형태와 기능은 대개 유전자 정보에 의해 결정된다. 분자생물학의 발달로 인해 정상 성장과 형태 형성에 중요한 유전자에 대한 정보가 밝혀지고 있고 이는 현대 두개안면 생물학의 근간이 되고 있다. 밝혀진 사실들 중 주목할 만한 것은 섬유아세포 성장인자2 (FGFR2)에서의 특이한 돌연변이가 어퍼트 증후군 (Apert syndrome)의 발생과 관련이 있다는 것이다. 어퍼트 증후군은 두개 관상봉합의 조기 유합과 사지의 기형으로 특징지워진다. 그 중 특히 두개골 유합증의 병인과 형성기전을 연구하기 위해 본 연구에서 유전자 변환기법을 시도하여 어퍼트 증후군의 유발인자로 알려진 FGFR2에서의 단일 아미노산 치환 돌연변이를 재연한 인위 유전자구조물을 제작하고 이를 미세주입법으로 쥐의수정란에 삽입하여 형질변환 쥐를 제작하였다. 본 연구에서는 전체 조직이 아닌 골조직에서 특이하게 활성화되는 전사촉진자(peomoter,제 I형 교원질 유전자의 전사촉지자) 를 이용하여 골조직에서만 돌연번이 유전자의발현을 재현함으로써 이 시도가 쥐에서 두개골유합증을 유발하는지 검증하고자 하였다. 초기 표현형 분석을 통해 어퍼트 환자에서 기대되는 두개골 유합증을 확인하였다. 또한 본 연구에서는 삽입된 변환유전자가 원활히 돌연변이 단백질을 생산라고 기능의 증가를 보임을 확인하였다. 이러한 동물 모델을 이용함으로써 이제 정상적 혹은 비정상적 두개골 및 봉합 발육에서는 FGFR2의 역할을 연구하는 것이 가능하리라 사료된다.

영문 초록

The form and function of the craniofacial structure critically depend on genetic information. With recent advances in the molecular technology, genes that are important for normal growth and morphogenesis of the craniofacial skeleton are being rapidly uncovered, shaping up modem craniofacial biology. One of them is fibroblast growth factor receptor 2 (FGFR2). Specific point mutations in the FGFR2 gene have been linked to Apert syndrome, which is characterized by premature closure of cranial sutures and craniofacial anomalies as well as limb deformities. To study pathogenic mechanisms underlying craniosynostosis phenotype of Apert syndrome, we used a transgenic approach; an FGFR2 minigene construct containing an Apert mutation (a point mutation that substitute proline at the position 253 to arginine; P253R) was introduced into fertilized mouse germ cells by DNA microinjection. The injected cells were then allowed to develop into transgenic mice. We used a bone-specific promoter (a DNA fragment from the type I collagen gene) to confine the expression of mutant FGFR2 gene to the bane tissue, and asked whether expression of mutant FGFR2 in bone is sufficient to cause the craniosynostosis phenotype in mice Initial characterization of these mice shows prematurely closed cranial sutures with facial deformities expected from Apert patients.. We also demonstrate that the transgene produces mutant FGFR2 protein with increased functional activities. Having this useful mouse model, we now can ask questions regarding the role of FGFR2 in normal and abnormal development of cranial bones and sutures.

키워드

섬유아세포 성장인자2 어퍼트 증후군 형질변환 쥐 골조직 특이 전사촉진자 FGFR2 Apert syndrome Transgenic mice Bone-specific promoter