흰쥐 태 뇌간의 세포배양에서 HPLC-전기화학검출을 이용한 Tyrosine Hydroxylase 활성 및 Dopamine의 정량

• 영문명: Application of HPLC with Electrochemical Detection to Assaying Tyrosine Hydroxylase Activity and Dopamine Content in Dissociated Cultures of Fetal Rat Brainstem
• 발행기관: 대한약리학회
• 저자명: 송동근(Dong-Keun Song) 위명복(Myung-Bok Wie) 박찬웅(Chan-Woong Park) 김영희(Yung-Hi Kim)
• 간행물 정보: 『대한약리학잡지』제27권 제1호, 7~12쪽, 전체 6쪽
• 주제분류: 의약학 > 기타의약학
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 1991.06.30

국문 초록

쥐(태령 14일) 뇌간 세포배양에서 발달과정에 따른 Tyrosine hydroxylase(TH) 활성 및 dopamine의 양적 증가를 전기화학 HPLC를 이용하여 측정하였다. TH 활성 및 dopamine의 양은 배양 7일까지 점차 증가하였다. 배양 7일째에 여러 약물들의 dopamine 대사에 대한 영향을 조사하였다. TH 억제제인 α-methyl-p-tyrosine 및 aromatic amiono acid decarboxylase 억제제인 NSD-1015는 효과적으로 dopamine을 고갈시켰다. Dopamine은 reserpine에 의해 고갈되었고, parglyine에 의해 증가되었다. 일주일 배양한 세포의 배양액에 tetrodotoxin(0.1μM)을 7일간 투여하였을 때 TH 활성은 현저히 감소하였다. 이상의 결과들은 배양세포의 dopamine 대사가 뇌 dopamine 대사를 충실히 반영함을 나타낸다. 뇌간 세포의 배양에서 HPLC-전기화학검출을 이용한 TH 활성 및 dopamine의 측정은 중추 dopamine계의 약리 및 독성 연구에 유용하리라 사료된다.

영문 초록

We measured the developmental increase of tyrosine hydroxylase(TH) activity and dopamine content with high performance liquid chromatography with electrochemical detection(HPLC-EC) in dissociated cultures of fetal rat brainstem(E14). TH activity and dopamine content increased progressively upto 7 days in vitro, when the effects of various drugs on the dopamine contents were studied. α-Methyl-p-tyrosine, a TH inhibitor and NSD-1015, an inhibitor of aromatic amiono acid decarboxylase effectively depleted dopamine contents. Dopamine contents were depleted by reserpine and increased by pargyline. When cultures grown for 1 week in control medium were then exposed to tetrodotoxin(0.1μM) for 7 days, exposure to tetrodotoxin markedly decreased TH activity. All the above results indicate that dopamine metabolism in the cultered cells reflect reliably the property of brain dopamine metabolism. We suggest that measuring TH activity and dopamine content in brainstem culture with HPLC-EC can be useful tool in the study of pharmacology as well as toxicology of the central dopaminergic system.

키워드

Dopamine Tyrosine hydroxylase High performance liquid chromatography-electrochemical detection Dissociated culture of fetal rat brainstem