Evaluation of neutral red uptake and alamar blue assays using hacat cell as a screening test for skin irritancy

• 발행기관: 한국예방수의학회
• 저자명: 이종권(Jong Kwon Lee) 남기택(Ki Taek Nam) 김부영(Pu Young Kim)
• 간행물 정보: 『Korean Journal of Veterinary Public Health』Vol.23, No.3, 183~188쪽, 전체 6쪽
• 주제분류: 의약학 > 면역학
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 1999.09.30

국문 초록

인체 피부세포의 배양을 이용한 시험은 피부독성을 평가하는 시험에 유용하게 사용하고 있다. 본 연구는 사람 각질 세포로 알려진 HaCaT 세포를 이용하여 수종의 보습제에 대한 세포독성을 평가하고자 시행하였다. 보습제의 자극 정도에 대한 세포의 독성평가는 Neutral Red Uptake (NRU) assay 방법과 Alamar Blue(AB) assay 방법을 이용하여 평가하였으며, in vivo 시험은 인체 첩포시험을 이용하여 평가하였다. 세포독성을 두 assay로 검증해 본 결과 용량 의존성을 보였다. 인체 첩포시험과 in vitro 시험반응과는 좋은 상관관계를 보였다. In vivo 시험인 인체 첩포시험과 in vitro 시험인 NRU assay의 IC₅₀값과의 상관지수는 0.714를 보였고 또 다른 in vitro 시험인 AB assay의 IC₅₀값과의 상관지수는 0.657을 나타내었다. 본 연구결과 배양된 HaCaT cell을 이용한 AB assay와 NRU assay는 수종의 보습제에 대한 인체 피부의 자극을 예측하는 방법으로 유용하게 사용될 수 있을 것으로 사료된다.

영문 초록

Cultured human skin cells have been widely used for assessing the skin irritancy of various humectants. In this study we used HaCaT cell (immortalized human keratinocyte). The irritation potential of humectants was assessed by human skin patch test, the neutral red uptake (NRU) and Alamar Blue (AB) assays. As a result of cytotoxicity assessed by NRU and AB assays, six humectants were seen in a dose dependent manner. There was a relatively good correlation between the in vitro and human patch test scores for the humectants tested. The correlation of NRU assay on the basis of IC₅₀ values with human patch test data yielded a correlation coefficient of r=0.714. The correlation of AB assay data on the basis of IC₅₀ values with human patch test yielded a correlation coefficient of r=0.657. The result of our study suggest that AB and NRU assay using cultured HaCaT cell can be used as an alternative method for screening the dermal irritancy of various humectants. And we found NRU assay would be possible alternative method to evaluate skin irritation potential and was better than the AB assay.

목차

ABSTRACT

INTRODUCTION

MATERIALS AND METHODS

RESULTS

DISCUSSION

REFERENCES

국문요약

키워드

HaCaT cell Alamar blue assay Neutral red uptake assay Humectant Skin irritation