GH₃ 뇌하수체 종양세포의 분화에 미치는 laminin, Matrigel 및 EGF의 영향

• 영문명: EGF Enhances the Differentiation Effect of the Extracellular Matrix Components on the GH₃ Pituitary Tumor Cell
• 발행기관: 대한해부학회
• 저자명: 정경아(Gyung-Ah Jung) 남선영(Seon Young Nam) 이병란(Byung-Lan Lee)
• 간행물 정보: 『대한해부학회지』제34권 제3호, 285~291쪽, 전체 7쪽
• 주제분류: 의약학 > 의학일반
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2001.06.30

국문 초록

뇌하수체 앞엽에는 여러 가지 종류의 호르몬 분비세포가 존재하므로 한가지 종류의 호르몬 세포만을 상대로 연구를 진행하기에 어려움이 있다. GH3 세포는 뇌하수체종양세포로서 젖샘자극호르몬 (PRL)과 성장호르몬을 분비하는 뇌하수체 세포의 특성을 유지하지만 배양기질에 부착력이 낮으며 작은 비율의 세포만이 PRL을 발현하고 장기간 배양시에는 세포의 과증식이 일어나므로 장기배양이 어렵다. 세포사이물질(ECM)은 단세포배양시에 일어나는 세포의 특성소실을 방지하기 위하여 배양기질로 사용되고 있다. ECM과 성장조절인자는 서로 상호작용을 통하여 세포에 영향을 미치나 이때 성장조절인자가 세포에 미치는 영향은 배양기질로 사용된 물질의 종류에 따라 다르다고 알려져 있다. 따라서 본 연구에서는 성장조절인자인 EGF와 세포사이물질을 이용하여 GH3 세포의 PRL 세포로서의 분화를 최대화하고자 하였다. 이를 위하여 세포들의 성장, 증식 및 PRL 발현세포의 빈도를 관찰하기 위하여 세포수측정, bromodeoxyuridine (BrdU) 표지, BrdU 및 PRL에 대한 면역세포화학 염색을 시행하였다. 본 연구의 결과로부터 EGF는 본 연구에 사용된 배양기질인 배양용 플라스틱, laminin 및 Matrigel 위에서 GH3 세포수를 감소시키고 PRL 세포로의 분화를 증가시킴을 알 수 있었고 특히 Matrigel과 함께 사용시 가장 높은 분화도를 나타냄이 관찰되었다. 따라서 GH3 세포의 장기배양시에 과증식을 막고 특성소실을 최소화 하기 위해서는 Matrigel 위의 배양에서 EGF를 투여하는 것이 가장 효과적인 방법으로 사료되었다.

영문 초록

This study was performed in order to establish the culture system optimal for the study on pituitary prolactin cells using growth factor and extra cellular matrix components as the culture substrate. The effect of epidermal growth factor (EGF) alone or along with extracellular marix components on GH3 cell growth and PRL expression was assessed using cell count, BrdU-immunocytochemistry and PRL-immunocytochemistry in in vitro cultures on plastic, laminin and Matrigel. EGF decreased the cell growth, BrdU-labeling and increased the PRL-immunoreactive cells regardless of the culture substrate by day 3 of the culture. Matrigel was the best culture substrate to decrease the cell growth and to increase the PRL expression. EGF treatment in the Matrigel culture showed about 80.5% of PRL-immunoreactive cells by day 6 of the culture. These results indicated that Matrigel is the better culture substrate than plastic or laminin to inhibit the overgrowth and to increase the prolactin expression of the GH3 cell and that EGF and Matrigel causes very effective culture environment for the long-term culture of the GH3 cell by synergistic mechanism.

키워드

GH₃ 세포 EGF 세포사이물질 세포성장 PRL발현 Cell ECM Cell growth PRL expression