Methyl gallate의 세포독성과 항암활성에 관한 연구

• 영문명: Studies on the Cytotoxicity and Antineoplastic Activity of Methyl Gallate
• 발행기관: 대한해부학회
• 저자명: 한두석(Du Seok Han) 이승룡(Seung Ryong Lee) 정우영(Woo Young Jung)
• 간행물 정보: 『대한해부학회지』제34권 제2호, 131~139쪽, 전체 9쪽
• 주제분류: 의약학 > 의학일반
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2001.04.30

국문 초록

천연물로부터 독성에 의한 부작용이 적고 항암활성이 강한 물질을 개발할 목적으로 원광대학교 부속 자연식물원에 재 배하고 있는 신나무로부터 Methyl gallate (MG)를 분리하여 건강세포인 NIH 3T3 섬유모세포와 구강암세포인 인체 구강유 상피암종세포에 적용한 후 1차 검색에 이용되는 비색법 중 가장 민감하고 안정적인 Tetrazolium bromide (MTT) 정량분석 법과 Sulforhodamine B Protein (SRB) 정량분석법을 이용하여 항암활성을 측정하고 세포증식의 지표가 되는 핵소체 형성부위를 은 콜로이드 염색법으로 염색하여 핵소체 형성부위의 수를 산정하였으며 당단백질량을 간접적으로 알아보기 위하여 Periodic acid Schiff reaction (PAS) 염색을 실시하여 PAS 반응정도를 확인하였다. 1. MG 투여 후 MTT 정량분석 결과 NIH 3T3 섬유모세포에 대한 MTT50은 16677 μM이었고 인체 구강유상피암종세포에 대한 MTT50은 65.55 μM이었다. 2. MG 투여 후 SRB 정량분석 결과 NIH 3T3 섬유모세포에 대한 SRB50은 8701.23 μM이었고 인체 구강유상피암종세포에 대한 SRB50은 168.81 μM이었다. 3. 은 콜로이드 염색 후 NIH 3T3 섬유모세포의 핵소체 형성부위의 수는 변화가 없었으나 인체 구강유상피암종세포의 수는 현저히 감소하였다. 4. PAS 염색후 NIH 3T3 섬유모세포의 PAS 반응도에는 변화가 없었으나 인체 구강유상피암종세포의 PAS 반응도는 50 μM농도에서 음성반응을 나타냈다. 5. 세포의 광학현미경적 관찰 결과 NIH 3T3 섬유모세포의 변화는 미약하였으나 인체 구강유상피암종세포의 형태학적 변화는 심하였다. 이상의 결과에서 MG는 건강세포인 NIH 3T3 세포에 대하여는 무독성을, 인체 구강유상피암종세포에 대하여는 고독성을 나타냈다.

영문 초록

In order to develop antitumor agent which indicates weak side effects and strong antitumor activity, cytotoxicity and antitumor effects of MG was evaluated by MTT assay and SRB assay of colorimetric assay methods on the cultured NIH 3T3 fibroblasts and human oral epithelioid carcinoma cells (KB cells). KB cells were cultured in EMEM and RPMI 1640 media containing 10% fetal bovine serum, antibiotics and fungizone. After incubation for 24 hrs, the cells were treated with MG by dose dependent manner for 48 hrs under the same condition. The MTT and SRB quantity were measured by ELISA reader (Spectra Max 250, USA). The microscopic study was carried out to observed morphological change, Ag-NORs (argyrophylic nucleolar organizer region) number and PAS positive reacton of cultured KB cells. The results were as follows; 1. The MTT50 were 16677 μM in NIH 3T3 cell and 65.55 μM in KB cells treated with MG. 2. The SRB50 were 8701.23 μM in NIH 3T3 cell and 168.81 μM in KB cells treated with MG. 3. The number of Ag-NORs was not significant in cultured NIH 3T3 cells, but the number of Ag-NORs was significantly decreased in cultured KB cells treated with MG. 4. PAS reaction of cultured NIH 3T3 cells was not changed, but PAS reaction of cultured KB cells was changed to negative reaction. 5. Morphological changes of cultured NIH 3T3 cells treated with MG was weak, but KB cell treated with MG was severe. These results indicate that MG have noncytoxicity on NIH 3T3 fibroblasts and high cytotoxicity on KB cells.

키워드

NIH 3T3 섬유모세포 인체 구강유상피암종세포 MTT정량분석법 핵소체 형성부위 PAS 반응 NIH 3T3 fibroblasts Human oral epithelioid carcinoma cells MTT assay Ag-NORs stain PAS stain