Caspases-dependent Apoptosis in Human Melanoma Cell by Eugenol

• 발행기관: 대한해부학회
• 저자명: 김규천(Gyoo-Cheon Kim) 최돈수(Don-Soo Choi) 임장섭(Jang-Seop Lim) 정희찬(Hee-Chan Jeong) 김인령(In-Ryeon Kim) 이무형(Moo-Hyung Lee) 박봉수(Bong-Soo Park)
• 간행물 정보: 『대한해부학회지』제39권 제3호, 245~253쪽, 전체 9쪽
• 주제분류: 의약학 > 의학일반
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2006.06.30

국문 초록

Malignant melanoma is a highly metastatic tumor, resistant to chemotherapy and radiotherapy. Recent studies have suggested that many therapeutic agents used against cancer mediate their effects by induction of apoptosis of the cancer cells. Eugenol enhances the generation of tissue-damaging free radicals and inflammation or allergic reactions. In particular, it is more cytotoxic against cancer cells compared with normal fibroblasts. This study was performed to investigate whether the cytotoxic effect of eugenol is associated with the induction of apoptosis and involves activation of caspase in the human melanoma G361 cells. Eugenol-induced apoptosis was confirmed by MTT assay, Hemacolor stain, Hoechst stain, DNA electrophoresis, and Western blot analysis. Eugenol had a significant dose- and time-dependent inhibitory effect on the viability of G361 cells. Eugenol treatment induced caspase-3 and -6 cleavage, and activation. The caspase-3 substrates PARP and DFF45 are cleaved during eugenol-induced apoptosis. It was found that the casapase-6 substrate lamin A was cleaved, whose cleavage has been reported to be necessary for complete condesation of DNA during apoptosis. These results suggest that eugenol may constitute a potential antitumor compound against melanoma occurring in the skin and oral mucosa.

영문 초록

악성 흑색종은 높은 전이성을 가지며, 화학요법과 방사선요법에 저항성을 보이는 암이다. 최근의 연구들은 암에 이용되는 많은 치료약물들이 암세포에서 세포자멸사를 유도함으로써 그 효과를 가지는 것임을 제안하고 있다. Eugenol은 조직에 상처를 주는 free radical의 생성과 염증 또는 알러지 반응을 증가시킨다. 특별히 정상 섬유모세포에 비해 암세포에 더욱 큰 세포독성을 가지고 있는 것으로 알려졌다. 그래서 본 연구는 사람흑색종세포에서 eugenol이 세포자멸사와 연관된 세포 독성효과가 있는지와 그 과정에서 caspase의 활성이 수반되는지를 알아보고자 시행되었다. 본 연구는 eugenol이 G361 세포에서 세포자멸사를 일으킴을 확인했으며, eugenol이 유도한 세포자멸사는 MTT 분석법, Hemacolor 염색, Hoechst 염색, DNA electrophoresis 그리고 Western blot 분석법으로 증명되었다. Eugenol은 농도의존적 그리고 시간의존적으로 G361 세포의 생존율을 현격하게 감소시켰으며, eugenol 처리는 caspase-3와 -6의 분절과 활성을 유도했다. Caspase-3의 기질인 PARP와 ICAD/DFF45도 또한 eugenol이 유도한 세포자멸사 과정 중에 분절되었다. 그리고 또한 casapase-6의 기질인 lamin A의 분절이 관찰되었다. Lamin A의 분절된 형태는 DNA의 응축에 필수적인 것으로 알려져 있다. 본 연구결과는 eugenol이 피부나 구강점막에서 발생하는 사람흑색종에 대해서 잠재력을 가진 항암물질로서 기여할 수 있음을 제시하고 있다.

키워드

Eugenol Apoptosis Human melanoma cells eugenol 세포자멸사 사람흑색종