말초혈액단핵구와 화학적으로 손상된 각막세포의 혼합반응에 대한 시스테아민의 효과

• 영문명: Effect of Cysteamine on Human Peripheral Blood Mononuclear Cells-Chemically Injured Keratocytes Reaction
• 발행기관: 대한안과학회
• 저자명: 이영복(Young Bok Lee, MD) 현준영(Joon Young Hyon, MD, PhD) 위원량(Won Ryang Wee, MD, PhD) 정태영(Tae Young Chung, MD, PhD) 정의상(Eui Sang Chung, MD, PhD) 이가영(Ka Young Yi, MD, PhD) 신영주(Young Joo Shin, MD, PhD)
• 간행물 정보: 『대한안과학회지』Ophthalmological Society,volume56,number10, 1511~1519쪽, 전체 9쪽
• 주제분류: 의약학 > 기타의약학
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2015.09.30

국문 초록

목적: 말초혈액단핵구와 화학적으로 손상된 각막세포의 혼합반응에 대한 시스테아민의 효과를 알아보고자 하였다. 대상과 방법: 사람각막간질세포를 0.05 N NaOH로 60초간 처리하여 화학적으로 손상시킨 후 말초혈액단핵구자극 검사를 시행하였다. 혼합 말초혈액단핵구-각막세포반응은 이후 다양한 농도의 시스테아민(0-10 mM)으로 처리되었다. 세포 내 활성산소물질 형성 정도는 산화에 민감한 형광탐침자인 2′,7′-dichlorofluorescein diacetate (DCF-DA)를 사용하여 측정되었다. NaOH로 처리된 각막세포에 의해 촉진된 말초혈액단핵구의 증식 속도와 염증성 사이토카인 분비는 각각 bromodeoxyuridine 증식분석검사와 효소결합 면역흡수분석법으로 측정하였다. 결과: 말초혈액단핵구 증식은 시스테아민의 농도에 비례하여 억제되었다(p=0.019). DCF-DA 형광은 시스테아민 농도에 비례하여 감소하였다(p＜0.001). 시스테아민의 농도에 비례하여 기질분해효소-9 (matrix metalloprotease-9, MMP-9), 인터류킨-6 (interleukin-6, IL-6), 형질전환성장인자-베타1 (transforming growth factor-beta 1, TGF-β1)은 억제되었고(p＜0.05), 대식세포이동저해인자(macrophage migration inhibitory factor, MIF)는 증가하였다(p=0.008). 결론: 시스테아민이 활성산소물질의 억제를 통하여 화학적으로 손상된 각막세포에 의해 유발된 말초혈액단핵구의 증식과 염증 사이토카인의 분비를 억제하였다. 따라서 시스테아민이 화학적 각막손상 환자에서 치료제로 사용될 수 있을 것으로 기대된다.

영문 초록

Purpose: To investigate the effect of cysteamine on mixed peripheral blood mononuclear cells (PBMCs)-chemically injured keratocytes reaction (mixed lymphocyte-keratocyte reaction; MLKR). Methods: PBMC stimulation assay was performed after keratocytes were chemically injured with 0.05 N NaOH for 60 seconds. MLKR was treated with various concentrations of cysteamine (0-10 mM). Intracellular reactive oxygen species (ROS) formation was measured using the oxidation-sensitive fluorescent probe, 2′7′-dichlorofluorescein diacetate (DCF-DA). Proliferation rate of PBMCs stimulated by NaOH-treated keratocytes and secretion profiles of matrix metalloprotease-9 (MMP-9), transforming growth factor-beta1 (TGF-β1), interleukin-6 (IL-6), and macrophage migration inhibitory factor (MIF) were determined using the bromodeoxyuridine proliferation assay and enzyme-linked immunosorbent assay, respectively. Results: Proliferation rate of PMBCs was suppressed by cysteamine in a dose-dependent manner (p = 0.019). Fluorescence of DCF-DA decreased depending on cysteamine concentration (p < 0.001). MMP-9, IL-6 and TGF-β1 levels were suppressed by cysteamine in a dose-dependent manner (p < 0.05), whereas MIF levels increased with cysteamine concentration of 0.5-10 mM (p = 0.008). Conclusions: These study results indicate that cysteamine induced the ROS-mediated inhibition of inflammatory cytokine release and proliferation of PBMCs stimulated by chemically injured keratocytes. Thus, cysteamine can be used in the treatment of chemical corneal burns.

목차

대상과 방법

결 과

고 찰

키워드

Cysteamine Macrophage migration inhibitory factor Mixed peripheral lymphocyte-keratocyte reaction Reactive oxygen species Transforming growth factor-beta1