학술논문
종양치료제가 Ehrlich 암세포를 이식한 생쥐 지라조직에 미치는 영향
이용수 33
- 영문명
- Effects of Antitumor Agents on the Spleen of Mouse Implanted with Ehrlich Carcinoma Cells : An Autoradiographic Study
- 발행기관
- 대한해부학회
- 저자명
- 고정식(Jeong-Sik Ko) 안의태(E-Tay Ahn) 박경호(Kyung-Ho Park) 김진국(Jin-Gook Kim) 김의한(Eui-Han Kim) 정영신(Young-Shin Chung)
- 간행물 정보
- 『대한해부학회지』제33권 제3호, 315~326쪽, 전체 12쪽
- 주제분류
- 의약학 > 의학일반
- 파일형태
- 발행일자
- 2000.06.30
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국문 초록
이 연구는 Ehrlich 암세포를 이식한 생쥐에 몇 가지 항암제를 투여하였을 때 지라조직세포의 DNA합성에 미치는 영향
을 연구하기 위하여 시행하였다. 항암제로서는 일반적으로 많이 사용되는 대사길항제인 5-fluorouracil, 항암성항생제인
mitomycin C와 최근 국내에서 개발되어 상당한 실험적 효과가 보고된바 있는 AG60 (acriflavin과 guanosine 복합제, 태림제약)을 택하였다.
실험동물은 체중 25~30 g의 생쥐(ICR mouse)를 사용하였다. 정상대조군은 암세포를 이식하지 않은 동물을 사용하였으
며 실험군의 경우에는 각 동물의 샅고랑부위의 피부밑에 Ehrlich carcinoma cell (107 cell)을 이식한 후, 다음날부터 격일간격으로 실험군별로 각각 5-fluorouracil (30 mg/kg), mitomycin C (400 μg/kg), AG60 (5 mg/kg 또는 30 mg/kg)을 7회 주사하였고, 실험대조군에는 암세포를 이식하고 약물은 투여하지 않고 생리식염수를 매일 주사하였다. 모든 실험동물은 마지막 주사한 다음 날 methyl-3H-thymidine을 0.7 μCi/gm (specific activity 25 Ci/mmol, Amersham Lab., England)씩 꼬리정맥에 주사하고 70분 후에 도살하여, 지라조직을 떼어내어 10% formalin에 고정하였다. 동물의 도살은 오전 10시에서 11시 사이에 실시하였다. 조직은 파라핀 절편을 만들어 gelatin으로 전처리한 슬라이드에 부착한 다음, 암실에서 감광유제 (autoradiographic emulsion EM-1, Amersham Lab., England)를 입힌 후 냉암소에서 5주일 동안 보관한 후, D-19으로 현상하여 Meyer’s hematoxylin으로 핵을 염색하였다. 한편 지라조직의 백색속질, 적색속질 및 가장자리구역을 택하여 각 부위의 단위면적 0, 21 mm2에 분포하는 3H-thymidine 표지세포의 수를 계수하였다. 일반조직관찰을 위하여는 hematoxylin-eosin (H-E)염색을 시행한 후 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
1. Mitomycin C 투여군에서 핵이 농축된 변성세포와 농축핵을 포함하고 있는 큰포식세포가 가장 많이 관찰되었으며 5-
fluorouracil 투여군에서는 그 정도가 약했고, AG60 투여군은 정상대조군의 소견과 비슷하였다.
2. 자기방사법적 연구에서 thymidine이 표지된 세포들은 대부분 지라의 가장자리구역에 분포하고 있었다.
3. 자기방사법적 연구에서 단위면적당 (0.63mm2) 3H-thymidine 표지세포의 수는 정상대조군은 214.0±56.87개, 종양이식
대조군은 235.7±59.69개, 5-fluorouracil 투여군은 331.0±67.20개, mitomycin C 투여군은 137.0±33.48개, AG60 (5
mg/kg) 투여군은 124.6±34.28개, AG60 (30 mg/kg) 투여군은 64.9±16.26개 였다.
4. Mitomycin C 투여군, AG60 (5 mg/kg) 투여군 및 AG60 (30 mg/kg) 투여군은 정상대조군에 비하여 방사성동위원소에 표
지된 은입자의 수가 적은 세포가 많았으나, 5-fluorouracil 투여군은 정상대조군의 것보다 더 밀집되어 있는 세포가 많
았다. 특히 AG60 (30 mg/kg) 투여군의 경우에는 표지세포가 적을 뿐만 아니라 은입자의 수도 매우 적어서 표지과립이
겨우 구별될 정도의 세포가 대부분이었다.
이상의 결과를 종합하면 생쥐의 지라조직은 백색속질과 적색속질에 비하여 가장자리구역에 분포하는 세포들의 DNA합
성능력이 더 높으며, mitomycin C와 AG60은 지라조직을 구성하는 세포의 DNA합성에 억제적으로 작용하나 5-fluorouracil
은 반대의 결과를 보였다. 특히 AG60은 mitomycin C와 5-fluorouracil에 비하여 지라조직에 형태적인 손상을 주지 않으면서도 세포의 DNA합성을 효과적으로 억제하였다고 생각된다.
영문 초록
In this experiment, side effects of three anticancer drugs (5-fluorouracil, mitomycin C and AG60) on the structure of spleen were histologically studied.
Each of ICR mice was inoculated with 1×107 Ehrlich carcinoma cells subcutaneously in the inguinal area. From
next day, 0.2 ml of saline solution, 5-fluorouracil (30 mg/kg), mitomycin C (400 μg/kg), 5 mg/kg of AG60, or 30 mg/kg of AG60 (acriflavine (1) : guanosine (1) composition, Taerim Pharm. Co., Seoul, Korea) were injected subcutaneously every other day. The day following the 7th injection of anticancer drugs, each mouse was injected with a single dose of 0.7 μCi/gm of methyl-3H-thymidine (25 Ci/mmol, Amersham Lab., England) through tail vein. Seventy minutes after the thymidine injection, animals were sacrificed, and splenic tissues were collected and fixed in 10% neutral formalin.
Tissue blocks were washed, dehydrated, embedded and cut into 6 μm-thick sections. Deparaffinized sections were
coated with autoradiographic emulsion EM-1 (Amersham Lab., England) in the dark room and dried, and were kept in
a light-tight box. The sections were exposured for 5 weeks in the dark room, and were deveoped in D-19 developer.
The number of the labeled cells in the areas of the white pulp, the red pulp and the marginal zone (mean number of labeled cells per 0.21mm2) were observed and calculated.
The results were as follow:
1. On histological study, in the spleen of mitomycin C treated group, vacuoles containing pyknotic nuclei were
observed more frequently than in those of 5-fluorouracil treated group. Whereas in the AG60 treated group,
morphological changes of the spleen were not observed.
2. On autoradiographic study, most of the labeled cells were located near the marginal zone of the spleen.
3. On autoradiographic study, number of the labeled cells of normal control, experimental control, 5-fluorouraciltreated,
mitomycin C-treated, AG60 (5 mg/kg)-, and AG60 (30 mg/kg)-treated groups were 214.0±56.87, 235.7±59.69, 331.0±67.20, 137.0±33.48, 124.6±34.28, and 64.9±16.26, respectively.
4. In the mitomycin C treated group and AG60 (5 mg/kg or 30 mg/kg) treated group, labeled cells containing a few
silver grains of 3H-thymidine were observed more frequently than in those of the normal and experimental control
groups. But in the 5-fluorouracil treated group, number of the heavy labeled cells were observed more frequently
than in those of the normal and experimental control groups.
From the above results, DNA synthesis, in the cells of the marginal zone were more active than in the cells of the white pulp or the red pulp. And mitomycin C and AG60 may suppress the DNA synthesis of the splenic tissues.
Especially, AG60 does not results any histological defect on the splenic tissues. These result suggest that AG60 is expected as one of most effective anticancer drugs.
목차
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