경련이 흰쥐 대뇌겉질의 NADPH-diaphorase와 Calbindin D28k 양성 신경세포에 미치는 영향

• 영문명: Seizure-Related Change of NADPH-diaphorase and Calbindin D28k Positive Neurons in the Cerebral Cortex of Rats
• 발행기관: 대한해부학회
• 저자명: 차성재(Seong Jae Cha) 허영범(Young Buhm Huh) 박 찬, 이원규(Won Kyu Lee) 김정혜(Jung Hye Kim) 유진화(Jin Hwa Yoo) 안희경(Hee Kyung Ahn)
• 간행물 정보: 『대한해부학회지』제32권 제6호, 821~829쪽, 전체 9쪽
• 주제분류: 의약학 > 의학일반
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 1999.12.30

국문 초록

Kainic acid (KA)를 흰쥐에게 투여하여 경련을 유발한 후 대뇌겉질에 분포하는 NADPH-d와 calbindin D28k 신경세포의 변화에 대하여 알아보고자 NADPH-d 조직화학과 calbindin D28k 면역조직화학을 시행하였다. 또한 nNOS와 calbindin D28k mRNA의 양적인 변화를 확인하고자 RT-PCR을 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 대뇌겉질에서 constitutive NADPH-d 신경세포의 염색강도를 영상분석기의 microdensitometry 방법으로 측정한 결과 NADPH-d의 염색성은 대조군에 비해 KA를 투여한 전 실험군에서 통계적으로 유의성있게 증가한 염색성을 나타내었다. 특 히 KA 투여 1일과 3일군에서 강한 염색성을 보였고 그후 6일과 12일군에서는 시간경과에 따라 염색성이 약해지는 경향을 보였다. Calbindin D28k의 면역염색성을 측정한 결과는 NADPH-d 신경세포의 측정결과와 비슷하였다. KA 투여군에서는 대 조군에 없는 새로 발현된 NADPH-d 세포들이 관찰되며, 특히 운동겉질, 몸통감각겉질, 섬겉질, 청각겉질, 시각겉질, 후각뇌바깥겉질과 후각뇌주위겉질에 밀집되어 분포하였다. Calbindin D28k 신경세포들중에 새로 발현된 세포들이 KA 투여군 1일과 3일군의 운동영역과 몸통감각영역에서 관찰되었 다. 6일과 12일군에서는 대뇌겉질 전 영역에서 새로 발현된 calbindin D28k 신경세포들이 관찰되지 않았다. NADPH-d와 calbindin D28k의 이중염색결과 새로 발현된 NADPH-d 신경세포들이 밀집된 부분에서는 calbindin D28k 신경세포의 수가 대조군에 비해 적은 양상이었다. 대뇌겉질에서 nNOS mRNA는 KA 투여군에서 증가된 양상이었으나 calbindin D28k mRNA는 1일군에서는 약간 감소되는 경향을 보였으나 다른 군에서는 큰 차이가 없었다. 따라서 이 연구에서는 NOS와 calbindin D28k가 각각 다른 신경세포의 발현변화와 mRNA의 변화를 보여 물질에 따라서 KA에 의한 영향을 받는 기전이 다를 것으로 생각되었다. 또한 새로 발현된 NADPH-d 및 calbindin D28k 신경세포와 염색성이 증가된 NADPH-d 신경세포는 경련 후의 대뇌혈류조절과 신경활성에 영향을 줄 것으로 생각되었다.

영문 초록

Administration of kainate (KA) results in the induction of epileptiform activity and limbic motor seizures. Nitric oxide (NO) is a gaseous messenger that plays a role in neural transmission, long term potentiation, depression and cerebral blood flow. NO is formed by NO synthase (NOS) from arginine. NO mediates the increase in cerebral blood flow during seizure activity. However, the production site of NO has not been clearly defined. Recent report showed that constitutive NOS may be induced under certain conditions. Therefore, the present study was aimed to investigate the change of NOS and calbindin D28k in the rat cerebral cortex following seizure. Rats were injected with KA and killed at 6 hours, 1, 3, 6 and 12 days after seizure. Expressional change of nNOS and calbindin D28k was assessed by histochemistry, immunohistochemistry and RT-PCR in the rat brain. Induced NADPH-d positive neurons were observed in the cerebral cortex of 1, 3, 6 and 12 days after seizure and found in specific cortical areas, such as motor cortex, somatosensory cortex, auditory cortex, visual cortex, ectorhinal cortex and perirhinal cortex. The level of nNOS mRNA increased at 1, 3, 6 and 12 days after seizure compared with control group. Induced calbindin D28k positive neurons were observed in motor cortex and somatosensory cortex 1 and 3 days after seizure. The level of calbindin D28k mRNA in the cerebral cortex was slightly decreased at 1 day after seizure. Therefore, in this study, the induced NADPH-d, calbindin D28k positive neurons and upregulated NADPH-d positive neurons may influence the cerebral blood flow and neuronal activity in the cerebral cortex during post-seizure period.

키워드

경련 대뇌겉질 NADPH-diaphorase Calbindin D28k Seizure Cerebral cortex