복령다당체에 의한 NF-κB/Rel의 핵내 이동 활성화

• 영문명: Nuclear Translocation of NF-κB/Rel Component by PCSC22 Isolated from Poria cocos Sclerotium
• 발행기관: 대한해부학회
• 저자명: 이건영(Kun-Young Lee) 김한용(Han-Young Kim) 전영진(Young-Jin Jeon) 장인엽(In-Youb Chang)
• 간행물 정보: 『대한해부학회지』제37권 제3호, 301~308쪽, 전체 8쪽
• 주제분류: 의약학 > 의학일반
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2004.06.30

국문 초록

복령균핵(sclerotium of Poria cocos)은 진정제와 이뇨제로 사용되었으며, 또한 항경련작용과 항염증작용도 보고되었다. 최근의 항종양활성 보고로 미루어 면역계 활성을 통해 숙주의 방어 기전을 한층 더 강하게 해줄 것으로 추측된다. 복령균핵으로부터 정제된 다당체인 PCSC22가 일산화질소(nitric oxide, NO)를 증가시키고, inducible NO synthase (iNOS)의 전사를 유도하는 것으로 알려져 있다. 본 실험에서는 복령균핵이 대식세포에 작용하여 iNOS 유전자의 발현을 증가시키는 기전을 밝히기 위해 면역형광염색, electrophoretic mobility shift assay (EMSA), reporter gene assay 등을 실시하였다. 면역형광염색 소견에서 NF-κB/Rel의 구성단백질 중 하나인 p65단백질은 세포질에서 발현되고 있으며, PCS22를 처리하면 p65단백질이 핵으로 이동함을 알 수 있었다. PCSC22를 처리한 RAW 264.7세포에서 nuclear extract를 추출하여 EMSA로 분석한 결과, PCSC22에 의해 NF-κB/Rel이 DNA에 강하게 결합됨을 확인하였다. NF-κB/Rel과 iNOS 발현과의 관련성을 알아보기 위하여 NF-κB/Rel의 특이적 저해제인 SN50를 사용한 결과 SN50가 PCSC22에 의한 NO 생성을 저해함을 알 수 있었다. 결론적으로, PCSC22는 대식세포에 작용하여 iNOS 유전자의 발현이 자극되는 대식세포의 활성화는 전사촉진제인 NF-κB/Rel의 활성화를 통하여 유도되는 것으로 사료된다.

영문 초록

The sclerotium of Poria cocos Wolf, which grows on the roots of pine trees, has long been used as a sedative and diuretic (Chang and But, 1987). The accumulating data revealed that certain ingredients of the sclerotium of Poria cocos showed anti-tumor activities (Kanayama, 1986). Although the mechanism of anti-tumor activity is not known, the polysaccharides may potentiate the host defense mechanism through the activation of immune system. In the present study we show that PCSC22, a polysaccharide isolated from the sclerotium of Poria cocos with one percent sodium carbonate, significantly induces nitric oxide (NO) production and inducible NO synthase (iNOS) transcription. To further investigate the mechanism responsible for the induction of iNOS gene expression, we investigated the effect of PCSC22 on the activation of NF-κB/Rel, whose binding site was located in the promoter of iNOS gene. Immunohisto-chemical staining of p65 and p50 showed that PCSC22 produced strong induction of NF-κB/Rel nuclear translocation. Electrophoretic mobility shift assay (EMSA) further confirmed the activation of NF-κB/Rel by PCSC22. In conclusion, we demonstrate that PCSC22 stimulates macrophages to express iNOS gene through the activation of NF-κB/Rel.

키워드

복령 대식세포 iNOS NF-κB/Rel Sclerotium of Poria cocos Macrophages iNOS NF-κB/Rel