섬유주세포에서 호모시스테인이 기질금속단백분해효소-9의 발현과 세포고사에 미치는 영향

• 영문명: Effect of Homocysteine on the Expression of Matrix Metalloproteinase-9 and Apoptosis in Trabecular Meshwork Cells
• 발행기관: 대한안과학회
• 저자명: 김정엽 김재우
• 간행물 정보: 『대한안과학회지』volume64,number3, 239~244쪽, 전체 6쪽
• 주제분류: 의약학 > 기타의약학
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2023.03.31

국문 초록

목적: 망막내피혈관세포에서 기질금속단백분해효소(matrix metalloproteinase, MMP)-9의 활성과 세포고사를 유발하는 것으로 알려진 호모시스테인(homocysteine, Hcy)이 섬유주세포에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 대상과 방법: 섬유주세포를 일차배양한 다음 저농도포도당(5 mM)을 함유한 배지(low glucose, LG)와 고농도(20 mM)의 포도당을 함유한 배지(high glucose, HG)를 이용하여 100 μM Hcy에 3일간 노출시켰다. MTT (3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide) assay로 세포의 생존을 측정하였고 western blot으로 MMP-9과 tissue inhibitor of MMP (TIMP)-1 단백의 활성을측정하였다. Annexin-propidium iodide 이중염색을 이용한 유세포분석을 시행하여 세포고사의 정도를 측정하였다. 결과: HG에 Hcy를 노출시킨 경우 HG에 비하여 세포의 생존율이 감소하였다(p=0.036). HG에 비하여 HG와 Hcy를 함께 노출시킨경우 TIMP-1 단백의 활성은 저하되었으나 통계학적으로 유의하지 않았으며(p=0.094), MMP-9 단백의 활성도 유의한 차이를 보이지않았다(p=0.413). 또한 HG에 Hcy를 함께 노출시킨 경우 HG에 비하여 세포고사의 정도에는 영향을 미치지 않았다(p=0.437). 결론: 망막내피혈관세포와는 달리 섬유주세포에서는 Hcy가 TIMP-1과 MMP-9 단백의 활성, 세포고사의 정도에는 유의한 영향을 미치지 않았다. 따라서 섬유주세포에서 Hcy가 미치는 영향은 제한적일 것으로 생각된다.

영문 초록

Purpose: In retinal endothelial cells, homocysteine (Hcy) activates matrix metalloproteinase (MMP)-9, which results in apoptosis. This study investigated these effects of Hcy in human trabecular meshwork cells (HTMC). Methods: HTMC cultures using 5 mM low or 20 mM high glucose (HG)-containing media were exposed to 100 μM Hcy for 3 days. Cell viability was assessed with the MTT (3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide) assay. The MMP-9 and tissue inhibitor of MMP (TIMP)-1 levels were measured by western blotting and the degree of apoptosis was analyzed with flow cytometry using Annexin-propidium iodide double staining. Results: Exposure to Hcy in HG decreased cell viability compared to HG alone (p = 0.036). Compared to HG alone, co-exposure to Hcy with HG decreased the TIMP-1 levels, albeit not significantly (p = 0.094), and did not affect the MMP-9 levels (p = 0.413). In addition, co-exposure to Hcy with HG produced no difference in the degree of apoptosis compared to HG alone (p = 0.437). Conclusions: Unlike in retinal endothelial cells, Hcy did not affect the activities of TIMP-1, MMP-9, or the degrees of apoptosis significantly in HTMC. Thus, the effects Hcy may be limited in HTMC.

목차

대상과 방법

결과

고찰

REFERENCES

키워드

Apoptosis High glucose Homocysteine Matrix metalloproteinase Trabecular meshwork