황화수소가 섬유아세포의 생존과 교원질 겔의 수축에 미치는 영향

• 영문명: Role of Hydrogen Sulfide in the Survival of Fibroblasts and Fibroblast-mediated Contraction of Collagen Gel
• 발행기관: 대한안과학회
• 저자명: 박현진(Hyeon Jin Park) 김재우(Jae Woo Kim)
• 간행물 정보: 『대한안과학회지』Ophthalmological Society,volume60,number10, 975~981쪽, 전체 7쪽
• 주제분류: 의약학 > 기타의약학
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2019.10.30

국문 초록

목적: 황화수소가 배양된 인체 테논낭 섬유아세포의 생존과 콜라겐 겔의 수축에 미치는 영향에 대해 알아보고자 하였다. 대상과 방법: 일차배양한 섬유아세포에 0, 100, 200, 300 μM 황화수소(Sodium hydrogen sulfide, NaHS)에 이틀간 노출시켜 MTT (3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide assay를 이용하여 세포의 생존을 측정하였고, annexin-V/propidium iodide 이중염색 후 유세포 분석을 이용하여 세포고사의 정도를 측정하였다. 전환 분화에 미치는 영향을 알아보기 위하여 5 ng/mL TGF-β1으로 자극한 후 α-smooth muscle actin (SMA) mRNA의 발현을 reverse-transcription polymerase chain reaction로 조사하였으며 섬유아세포를 교원질 겔 내에 봉입하여 수축성검사를 시행하였다. 결과: 300 μM NaHS는 섬유아세포의 생존을 감소시켰으며(p=0.013), 200 μM과 300 μM NaHS는 세포고사를 유의하게 증가시켰다(p<0.05). TGF-β1은 섬유아세포에서 α-SMA mRNA의 발현을 증가시켰으며(p=0.041), 100 μM NaHS에 동시에 노출시킨 경우 α-SMA mRNA의 발현이 감소하였고(p=0.039), 교원질 겔의 수축을 억제하였다. 결론: 황화수소는 고농도에서 섬유아세포의 생존을 감소시키며 세포고사를 유발하였다. 황화수소는 TGF-β1에 의한 α-SMA mRNA의 발현을 감소시켰으며 교원질 겔의 수축을 억제하였다. 따라서 황화수소는 섬유아세포의 생존에는 영향을 줄 수 있으며, 섬유아세포의 전환 분화를 억제하여 반흔형성을 감소시키는 작용을 나타낼 것으로 생각된다.

영문 초록

Purpose: To investigate the role of hydrogen sulfide in the survival and collagen gel contraction of cultured human Tenon’s capsule fibroblasts (HTCFs). Methods: Primarily cultured HTCFs were exposed to 0, 100, 200, or 300 μM hydrogen sulfide (sodium hydrogen sulfide, NaHS) for 2 days. Cellular survival was assessed by MTT (3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyltetrazolium bromide) assay. Degree of apoptosis was assessed with flow cytometry using annexin-V/propidium iodide double staining. To evaluate the effect of NaHS on cellular transdifferentiation, HTCFs were stimulated with 5 ng/mL TGF-β1 and the level of expression of α-smooth muscle actin (SMA) mRNA was assessed using reverse-transcription polymerase chain reaction. The cells were embedded in collagen gel, and the amount of gel contraction was measured. Results: NaHS at 300 μM reduced HTCF survival (p = 0.013); NaHS at both 200 and 300 μM increased apoptosis in a dose-dependent manner (p = 0.013 and p = 0.016). TGF-β1 increased the expression of α-SMA mRNA (p = 0.041); co-treatment with 100 μM NaHS decreased TGF-β1-induced α-SMA mRNA expression (p = 0.039) and inhibited collagen gel contraction. Conclusions: NaHS at high concentration reduced cellular survival and increased HTCF apoptosis. NaHS decreased TGF-β 1-induced increases in α-SMA mRNA expression and collagen gel contraction. Thus, hydrogen sulfide may suppress scar formation by inhibiting HTCF transdifferentiation and contraction of collagen gels.

목차

Abstract

대상과 방법

결과

고찰

REFERENCES

국문초록

키워드

Apoptosis Hydrogen sulfide Survival Transdifferentiation Tenon capsule fibroblasts