학술논문
담즙산 합성유도체(HS-1200)가 인체 유방암 세포주(MCF-7)에서 유도하는 방사선 감작 효과
이용수 41
- 영문명
- A Novel Chenodeoxycholic Derivative HS-1200 Enhances Radiation-induced Apoptosis in Human MCF-7 Breast Cancer Cells
- 발행기관
- 대한방사선종양학회
- 저자명
- 이형식(Hyung Sik Lee) 최영민(Young Min Choi) 권혁찬(Hyuk Chan Kwon) 송연숙(Yeon Suk Song)
- 간행물 정보
- 『대한방사선종양학회지』제22권 제2호, 145~154쪽, 전체 10쪽
- 주제분류
- 의약학 > 종양학
- 파일형태
- 발행일자
- 2004.06.30
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국문 초록
목 적: 인체 유방암 세포주인 MCF-7에 새로운 CDCA 합성유도체인 HS-1200을 방사선과 함께 처치하여 아포토시
스 유도 활성 및 방사선 감작 효과를 관찰하고자 하였다. 대상 및 방법: MCF-7 세포에 2∼8 Gy의 X-ray와 16μM 농도의 HS-1200을 처리한 세포들의 세포 생존 곡선을 clonogenic assay를 통하여 구하였다. 아포토시스 유도 확인은 8 Gy의 X-ray와 40μM 농도의 HS-1200을 전 처치하여 구한 agarose gel 전기영동 및 Hoechst staining을 이용하였다. 면역형광법을 이용한 cytochrome c, Bax 및 AIF들의 관찰과 미토콘드리아 막전위 측정을 시행하였다. Western blotting을 통한 PARP (poly (ADP-ribose) polymerase) cleavage, Bax, Bcl-2, Bak 및 AIF 들의 발현을 관찰하였다. 결 과: 2∼8 Gy의 X-ray를 조사한 군(R)과 HS-1200 처리 후 2∼8 Gy의 X-ray를 조사 한 군(HR)의 세포 생존 곡선을 비교하니 HR 군에서 세포 감작 효과를 관찰할 수 있었다. DNA ladder는 R군에서는 72 시간째 관찰되는 반면에 HR 군에서는 24시간째 관찰되어 DNA 분절이 빠르게 진행됨을 알 수 있었고, PARP cleavage의 관찰에서도 R 군에 비해 24시간 빠르게 진행되었다. 면역 형광법을 이용한 실험에서도 HR 군이 R 군에 비하여 미토콘드리아 막전위(ΔΨm)의 급격한 감소, cytochrome의 다량 방출, Bax의 증가된 점상 변화 등이 관찰되었고, AIF의 변화는 뚜렷하 지 않았다. Western blotting을 이용한 Bax, Bcl-2, Bak 및 AIF들의 발현을 관찰하였을 때 Bax 만 HR 군에서 시간대별로 증가되는 추세를 보인 반면 Bcl-2, Bak 및 AIF들의 발현은 특이한 차이를 발견할 수 없었다. 결 론: 인체 유방암 세포주(MCF-7)에서 새로운 담즙산 합성 유도체인 HS-1200은 방사선 조사에 의한 아포토시스의 유도를 감작시키는 사실을 관찰하였다. 아포토시스 유도감작 증가는 Bax/Bcl-2 분율의 상대적 증가로 기인한다고 생각한다. 상기 결과를 토대로 HS-1200의 항암 치료제로서의 역할에 관한 기초 자료로서의 유용성을 제시할 수 있었다.
영문 초록
Purpose: To examine whether a synthetic bile acid derivatives (HS-1200) sensitizes the radiation-induced
apoptosis in human breast cancer cells (MCF-7) and to investigate the underlying mechanism. Materials and Methods: Human breast cancer cells (MCF-7) in exponential growth phase were treated with HS-1200 for 24 hours at 37oC with 5% CO2 in air atmosphere. After removal of HS-1200, cells were irradiated with 2∼8 Gy X-ray, and then cultured in drug-free media for 24-96 hours. The effect of radiation on the clonogenicity of MCF-7 cells was determined with clonogenic cell survival assay with 16μM of HS-1200. The induction of apoptosis was determined using agarose gel electrophoresis and Hoechst staining. The expression level of apoptosis-related molecules, such as PARP, Bax, Bcl-2, Bak and AIF, were assayed by Western blotting analysis with 40μM of HS-1200 combined with 8 Gy irradiation. To examine the cellular location of cytochrome c, bax and AIF immunofluorescent stainings were undertaken Results: Treatment of MCF-7 cells with 40μM of HS-1200 combined with 8 Gy irradiation showed severalchanges associated with enhanced apoptosis by agarose gel electrophoresis and Hoechst staining. HS-1200combined with 8 Gy irradiation treatment also enhanced production of PARP cleavage products and increased Bax/Bcl-2 ratio by Western blotting. Loss of mitochondrial membrane potential (ΔΨm) and increased cytochromec staining indicated that cytochrome c had been released from the mitochondria in HS-1200 treated cells. Conclusion: We demonstrated that combination treatment with a synthetic chenodeoxycholic acid derivative HS-1200 and irradiation enhanced radiation-induced apoptosis of human breast cancer cells (MCF-7). We suggest that the increased Bax/Bcl-2 ratio in HS-1200 co-treatment group underlies the increased radiosensitivity of MCF-7 cells. Further futures studies are remained elusive.
목차
서 론
실험 재료 및 방법
실험 결과
고안 및 결론
키워드
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