말초혈액 내 림프구의 방사선에 의한 아포프토시스

• 영문명: Radiation-Induced Apoptosis of Lymphocytes in Peripheral Blood
• 발행기관: 대한방사선종양학회
• 저자명: 오윤경(Yoon Kyeong Oh) 이태범(Tae Bum Lee) 남택근(Taek Keun Nam) 기근홍(Keun Hong Kee) 최철희(Cheol Hee Choi)
• 간행물 정보: 『대한방사선종양학회지』제21권 제1호, 75~81쪽, 전체 7쪽
• 주제분류: 의약학 > 종양학
• 파일형태: PDF
• 발행일자: 2003.03.31

국문 초록

목 적 : 방사선에 의해 유도되는 림프구의 아포프토시스를 정상 성인의 말초 혈액에서 유세포계측검사로 측정할 때 소량의 혈액으로도 검사가 가능한가를 알아보고 선량 증가와 방사선조사 후 시간 경과에 따른 반응 정도를 알아보고자 본 연구를 시행하였다. 대상 및 방법 : 건강한 성인 남녀 11명을 연구 대상으로 하여 말초혈액 10 mL에서 림프구를 분리하고 이를 각각 15개로 나누어서 실험하였다. 선형가속기를 이용하여 0.5, 1, 2, 5 Gy의 방사선을 조사한 후 24, 48, 72시간 동안 배양하였다. 림프구의 아포프토시스를 정량적으로 측정하기 위해 유세포계측검사를 시행하였으며, 별도로 DNA fragmentation assay와 전자현미경검사를 이용하여 아포프토시스 소견을 추가로 관찰하였다. 결 과 : 방사선을 조사하지 않았을 때의 자발성 아포프토시스율(%)은 배양 후 24, 48, 72시간이 경과함에 따라 증가하는 소견을 보였다(1.761±0.161, 3.563±0.564, 11.098±2.849). 또한 0.5, 1, 2, 5 Gy의 방사선을 조사하여 24, 48, 72시간 동안 배양한 후 측정한 아포프토시스율(%)은 선량 증가와 방사선조사 후 시간 경과에 따라 점차 증가하였다. 방사선조사 후 24시간 후에 0.5~1, 1~2, 2~5 Gy구간의 아포프토시스율의 증가는 비교적 저 선량 영역인 0.5~1, 1~2 Gy에서 2~5 Gy 구간보다 더 큰 기울기를 보였고, 48, 72시간 후에도 0.5~1 Gy구간에서 가장 큰 기울기를 보였다. 결 론 : 유세포계측검사는 10 mL의 혈액으로 15개의 검사 결과를 낼 수 있었으므로 한 검사당 1 mL 미만의 혈액으로도 충분히 검사할 수 있겠으며, 방사선량 증가에 따라 반응의 정도도 증가하였으며, 아포프토시스 관찰 시기는 혈액 채취 후 24시간이나 48시간 후가 적절하다고 사료된다

영문 초록

Purpose : This study quantitatively evaluated the apoptosis in human peripheral blood lymphocytes using flow cytometry, and investigated the possibility of using the method, with a small amount of blood, and the time and dose dependence of radiation-induced apoptosis. Materials and methods : Peripheral blood lymphocytes were isolated from the heparinized venous blood of 11 healthy volunteers, 8 men and 3 women, with each 10 ml blood being divided into 15 samples. The blood lymphocytes were irradiated using a linear accelerator at a dose rate of 2.4 Gy/min, to deliver doses of 0.5, 1, 2 and 5 Gy. The control samples, and irradiated cells, were maintained in culture medium for 24, 48 and 72 hours following the irradiation. The number of apoptotic cells after the in vitro X-irradiation was measured by flow cytometry after incubation periods of 24, 48 and 72 hours. We also observed the apoptotic cells using a DNA fragmentation assay and electron microscopy. Results : The rate of spontaneous apoptosis increased in relation to the time interval following irradiation (1.761±0.161, 3.563±0.564, 11.098±2.849, at 24, 48, and 72 hours). The apoptotic cells also increased in the samples irradiated with 0.5, 1, 2 and 5 Gy, in a radiation dose and time interval after irradiation manner, with the apoptosis being too great at 72 hours after irradiation. The dose-response curves were characterized by an initial steep increase in the number of apoptotic cells for irradiation doses below 2 Gy, with a flattening of the curves as the dose approached towards 5 Gy. Conclusion : The flow cytometric assay technique yielded adequate data, and required less than 1 mL of blood. The time and dose dependence of the radiation-induced apoptosis, was also shown. It is suggested that the adequate time interval required for the evaluation of apoptosis would be 24 to 48 hours after blood sampling.

키워드

림프구 말초혈액 방사선조사 아포프토시스 Lymphocyte Blood Radiation Apoptosis